肾纤维化

一、导语

肾纤维化是肾组织在应对慢性损伤和修复时，细胞外基质异常增生并沉积，导致正常肾组织被纤维组织取代，进而引发慢性肾功能不全，最终可能肾衰竭。现有多种肾纤维化动物模型，其中单侧输尿管结扎模型因操作简便、应用广泛，是研究肾间质纤维化机制及新药的重要工具。

二、肾和输尿管解剖

小鼠输尿管发自肾盂，止于膀胱;行于背侧腹膜外，在接近膀胱处进入腹腔连接膀胱。其周围有脂肪包裹，并跨越髂腰动静脉腹面。

三、器械材料

(1)仪器:恒温手术台。

(2)器械:眼科剪，眼科镊，持针器，扩张器。

(3)材料:1mL注射器，脱毛膏，棉签，7-0缝合线，5-0合线。

四、手术流程

(1)小鼠腹腔注射麻醉。

(2)术区备皮，仰卧固定于恒温手术台上。术区常规消毒。

(3)在腹中线划开腹部皮肤和腹壁。

(4)拨开肠管，暴露左肾，沿肾门向后暴露左输尿管。

(5)用2根 7-0缝合线穿过壁腹膜，从输尿管深面穿过后结扎，1根近肾下缘，1根在其后方约 0.5 cm 处。

(6)剪断两结扎线间输尿管。

(7)用5-0 丝线分层缝合腹壁和皮肤切口。

(8)常规伤口消毒。

(9)将小鼠放于 37℃保温垫上复苏，苏醒后放回笼内饲养观察

五、模型评估

(1)剖腹探查左肾，发现左肾肿胀，内有大量尿液潴留。

(2)同时取肾做石蜡切片并进行Masson染色、H-E染色、【型胶原蛋白(COL1)和平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组织化学染色，均发现肾间质纤维化，即表示造模成功。

六、讨论

(1)一侧输尿管结扎，另一侧可作自身对照。

(2)该模型的肾纤维化是以肾间质纤维化为主，肾小球病变较轻。该模型可在短期内手术诱导肾间质纤维化，7天会有明显纤维化，10天后可形成严重纤维化。

(3)术后7、10 天检测血肌酐、尿素氮，结果接近正常值，主要是由于右侧肾正常维持血肌酐、尿素氮指标正常。

(4)操作注意事项:

① 需要准确找到输尿管，可从肾门向下寻找，辨认乳白色的细长的输尿管，不需要分离结缔组织，直接用缝合针由输尿管下方穿过后打结，避免过度损伤壁腹膜。

②两根结扎线间距要合适，因为在剪开两线间的输尿管时，若间距过小，线结易滑脱，若间距过大，打结操作空间小，不易操作。

③在结扎输尿管时，注意打结松紧合适，因为过松会导致结扎失败，过紧导致输尿管从结扎处被勒断。

④术后注意保温，避免麻醉后小鼠低体温休克死亡，可将小鼠放在保温垫上。当小鼠可以爬行时，再放回笼内饲养。

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