肥胖动物模型构建与指标评价

一、介绍

通过60%高脂饲料喂养5周龄雄性C57BL/6J小鼠12周，可建立稳定的肥胖模型。选择8周龄前开始造模，使肥胖稳定期处于小鼠成年阶段。体重、体脂率和血脂四项为关键指标，反映肥胖及脂质代谢状况。C57BL/6J小鼠因易发生肥胖和代谢异常，是研究人类单纯性肥胖症的良好模型，雄性小鼠对高脂饲料更敏感，肥胖形成更快更显著。

二、造模方法

将126只5周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠经5天适应性喂养后，按体重被随机分为正常对照组（CON组，18只）和高脂模型组（HFD组，108只），每组每笼6只进行饲养。

 1.  饲养方法

CON组：普通饲料喂养，饲料成分包括10.0%脂肪、19.0%蛋白质和71.0%碳水化合物，热量为3.6 kCal/g。

HFD组：高脂饲料喂养，饲料成分包括60.0%脂肪、19.4%蛋白质和20.6%碳水化合物，热量为5.0 kCal/g。

2. 实验过程

每日称量并记录饲料剩余量，按需供给。

每周称量并记录小鼠体重。

实验结束后，小鼠禁食不禁水12小时，次日用戊巴比妥钠麻醉后心脏采血，解剖取脏器，并称量腹股沟皮下脂肪、附睾脂肪、肾周脂肪和肩胛部棕色脂肪的湿重。

所有样本的血清离心后取上清，并保存于-80℃。

三、检测指标

（1）基础生理数据监测：

体重：使用电子天平，在每周的固定时间点进行称量，记录数据单位为克（g）。

Lees 指数：计算方式为小鼠体重（单位：克）的1/3除以体长（单位：厘米），再乘以1000，得出数值。

体脂率：将腹股沟皮下脂肪、附睾脂肪、肾周脂肪以及棕色脂肪的重量（单位：克）相加，然后除以小鼠的体重（单位：克），再乘以100%，得出体脂率。

摄入能量：通过每日固定时间点使用电子天平称量小鼠的食量（单位：克），并结合饲料的热量值，计算出每组小鼠每周的摄入能量变化。

（2）血清指标检测：

对小鼠的血清进行多种指标的检测，包括但不限于血糖、血脂等，以评估小鼠的代谢状况。

（Fig1 HFD组和 CON组小鼠不同饲养阶段体重变化）

四、实验动物运动方案

肥胖对照组不进行运动干预，而各运动干预组的大鼠则需先在跑步机上进行为期一周的适应性锻炼，速度范围从0至15米/分钟，每天锻炼时长为10到20分钟。运动强度的设定依据大鼠的健康状况，并参考经典跑台实验设计，同时根据实验实际情况灵活调整训练方案。

（Fig2 正常对照组、肥胖模型组、小强度运动组、中等强度运动组和大强度运动组大鼠体质量、肝质量、心脏质量、体脂率）

五、造模成功评价指标

若大鼠在喂养16周后，其体质量达到平均体质量的1.4倍以上，则被视为肥胖大鼠。体脂率的计算方法是将左、右肾周脂肪以及左右附睾脂肪的总重量除以大鼠的体质量，再乘以100%得出。

六、造模后观察指标

经过6周的运动干预后，对大鼠进行以下测试：测量体质量、肝脏重量、心脏重量以及计算体脂率（基于特定脂肪组织重量与总体质量的比例）；同时检测血脂水平、脂酶活性以及氧化应激相关指标。此外，还通过脂肪组织的病理切片来观察和分析脂肪细胞的形态结构特征。

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