小鼠疲劳模型——负重游泳

       CRS能模拟现代生活方式导致的疲劳，通过构建小鼠模型助力抗疲劳药物研发。检测体力疲劳主要分强迫和自主运动两类方法。强迫运动法，如负重游泳、握力测试等，通过衡量动物运动极限评估疲劳。自主活动法则观察动物在无干预下的活动量，反映其疲劳程度，类似于临床患者主动运动减少。

一、实验方法

1、实验目的

评估小鼠的疲劳状况和体力情况。

2、实验条件

水温：游泳箱控制为25±0.5°C，水槽保持为25±1°C

水深：游泳箱为25cm，水槽约为25cm（实际用于最后测试）

• 泳槽水深：50cm（用于训练阶段）
  

3、实验动物与分组

• 动物：小鼠
  
  
• 分组：筛选后适应游泳训练的48只小鼠，以数字随机分组法分为6组，每组8只
  
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  正常组
  
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• 模型组
  
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• 给药组（多个，具体数量未明确，但总和为40只，除正常组外）
  
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4、实验步骤

适应性喂养：所有小鼠适应性喂养7天。

负重准备：小鼠尾部附上8%自身体重的铅皮。

游泳筛选：进行筛选，确定适应游泳训练的小鼠。

游泳训练：

第1周：无负重游泳训练

第2周：负重2%体质量

第3周：负重4%体质量

第4周：负重5%体质量

除正常组外，其他组小鼠每天进行负重游泳训练。

训练周期：28天

每次训练至力竭（小鼠下沉后3s不露出水面）。

无负重游泳测试：训练结束后，进行一次无负重游泳测试，记录小鼠力竭时的游泳时间。

最终游泳试验：

最后一次给药30min后，小鼠尾部1/3-2/3处负重（体重的5%）。

放入水深约25cm的水槽中进行游泳试验。

观察和记录小鼠从开始游泳到沉入水中10s不能浮出水面（力竭状态）的时间。

（不同时长CRS对ICR小鼠负重游泳耐力的影响）

二、检测指标

（1）外在表现评估：重点观测大鼠的精神饱满度、体重变化、进食情况、活动习性、行走姿态、排泄功能（大小便），以及爪部、鼻唇部、耳部、皮毛的色泽和整体外观。

（2）糖原储备分析：糖原，作为一种动物特有的淀粉形式，也被称为肝糖或糖元，是由葡萄糖分子以α型糖苷键连接形成的支链多糖，作为动物的能量储备物质。在生物体内，肝糖原主要储存在肝脏中，而肌糖原则储存在肌肉组织中。当小鼠体内的肝糖原和肌糖原含量显著下降时，这标志着疲劳模型的构建取得了成功。

（3）尿素氮水平监测：尿素氮作为蛋白质代谢的中间产物，其水平在机体持续运动超过30分钟后会有所上升。这是因为此时蛋白质开始参与能量供应，其分解代谢过程加剧，导致血清中尿素氮的含量增加。

（4）乳酸脱氢酶活性评估：乳酸的积累被视为导致疲劳的关键因素之一。乳酸的堆积会提升体内氢离子浓度，降低动作电位，并抑制肌酶的活性，进而直接影响肌肉的力量表现。为了清除运动中产生的乳酸，乳酸脱氢酶起着至关重要的作用。作为代谢乳酸的主要酶类，乳酸脱氢酶的活性水平能够直接反映乳酸的清除效率。

（5）肌酐含量分析：肌酐是临床评估肾功能的关键指标之一。在机体经历长时间、高强度的运动后，肾脏的负担会增加，这可能导致肌酐水平有所上升。

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