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(一)HE染色介绍之染色原理
发布日期:2024-08-27
HE染色介绍之染色原理
苏木精-伊红染色法,简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
一、染色原理
1、嗜酸型&嗜碱性
易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性和嗜酸性;而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性。
(1)嗜碱性:嗜碱性指组织细胞内酸性成分易于被碱性染料(如苏木精等)着色,显示亲和力。
在常规染色技术中,使用pH值约为6的染色液,细胞内部的酸性组分,诸如细胞核的染色质、腺细胞与神经细胞中的粗面内质网,以及透明软骨基质等,均能有效吸附并着色于碱性染料,从而清晰呈现其结构与特征。
(2)嗜酸型:组织细胞内的碱性成分与酸性染料(如伊红)具有亲和性,染色后呈现红色。这种特性在细胞质中的蛋白质如血红蛋白、嗜酸粒细胞颗粒、胶原纤维及肌纤维等上尤为显著,它们被酸性染料着色,因此被称为嗜酸型物质,显示了其独特的化学性质与染色特征。
2、苏木精&伊红
(1)苏木精:苏木精,源自苏木的酚类化合物,是细胞学常用染色剂,常与伊红搭档。其难溶于冷水乙醚,却易溶于热水乙醇及碱性溶液。在化学分析中,它作为比色、显微分析及pH指示剂(5.0-6.0黄至紫变),作为碱性染料,将细胞核染成蓝色,且在水或碱液中易被氧化成红棕色。
(2)伊红:伊红,酸性染料,分水溶与醇溶型。水溶伊红染细胞浆红/粉红,与苏木素染核蓝形成对比,广泛用于病理切片染色。醇溶伊红用于特定化学分析,如F离子检测及溴、碘离子滴定指示。
3、细胞染色
(1)细胞核染色:苏木精,碱性天然染料,专染细胞核。DNA双螺旋外侧带负电,与苏木精正电荷结合着色。组织成分不同,染色各异。处理后,细胞核显深蓝,其余成分脱色。
(2)细胞浆染色:细胞浆含蛋白质,染色受pH影响。pH近等电点时难染色;pH偏高时,胞浆带负电,与核同染难辨。需调低pH加醋酸,使胞浆带正电,被伊红(酸性染料)阴离子染色成红/粉,与蓝色核对比鲜明。
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