肿瘤块皮下植入法

一、背景

       肿瘤块皮下植入操作多为切开皮肤，在浅筋膜内包埋肿瘤块，然后缝合皮肤。然而，用穿刺针直接穿刺皮肤和皮肌，将肿瘤块移植到浅筋膜内，有操作快速、损伤小、肿瘤成活率高的优点。

二、解剖基础

小鼠躯体大部分皮肤游离性大，皮肌下面有松弛的浅筋膜（如下图），

（皮肤组织切片，H-E染色。双箭头为小鼠腹部浅筋膜区域。）

并有游离的血管走行其间。血管穿过浅筋膜进入皮肌后不再游离。细小的分支穿过皮肌进入皮肤真皮下层。真皮下层以脂肪组织为主，有大量神经和小血管分布，由于该层非常薄，不能容纳大量肿瘤细胞，更无法容纳肿瘤组织块，故实验中一般都将肿瘤块移植在浅筋膜层内。

三、器械与耗材

1、自制穿刺针：18G针头,长34mm;

内置实心针芯直径0.8 mm，长80 mm;标准1 mL 注射器截取 46 mm。

2、显微尖镊；冰盘。

四、操作方法

1. 将新鲜采集的肿瘤置于冰盘上的培养液中，剪成2mm长的条状。

2.将消毒的无菌穿刺针的针芯拉出2mm。

3.用无菌镊子将肿瘤块从针孔处填进穿刺针头内。

4. 确定要接种肿瘤块的位置，本实验接种位置在右前肢腋窝下。用针头测量接种位置与皮肤进针孔之间的距离。进针长度设定为2cm。

5.针尖穿过皮肤，进入浅筋膜后平行皮下进针，针尖至指定位置后，固定针芯。

6.抽出针筒约2mm，这时针芯和针头尖端平齐，肿瘤块滞留于浅筋膜内。

7.将针芯和针头一起拔出体外，移植完毕。可见浅筋膜下种植处皮肤局部微隆起。

8.不必缝合进针孔，待小鼠苏醒后返笼。

五、操作讨论

1、把新鲜的肿瘤组织放入培养液内。

2、新鲜肿瘤组织如果在 20 分钟内不能种植，需要将其置于冰上，以降低肿瘤细胞代谢率，保存其生物活性，保证成活率。

3、肿瘤块安置不要用针芯将其推出针头，而要依靠针头后退，将肿瘤块滞留在浅筋膜内。这样可以避免肿瘤块挤入浅筋膜内，对肿瘤细胞的损伤小。

4、一般接种后3~4天，肿瘤逐渐缩小，以致皮肤近乎完全平复。

5、接种18天后，肿瘤生长隆起明显可见，术后3周，肿瘤长大。

参考资料：Perry小鼠实验手术操作

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