气溶胶气管内雾化造模方法

将小鼠放入小动物麻醉机中进行异氟烷吸入性麻醉，待小鼠麻醉后将其置于气管插管平台上，呈４５°仰卧正位。麻醉程度的判断：小鼠整个身体开始呈规则的胸腹式呼吸，瞳孔稍扩大、对光反射迟钝，无口腔反射。 体位摆好后，主操人员用眼科镊子夹住小鼠舌尖后向外一侧拉出，助手用小型手电筒垂直照射小鼠颈部，同时拉直尾巴避免气管弯曲。 然后主操人员通过气溶胶雾化喷射头紧贴小鼠舌根中央同时上压，在光源下找到会厌部不断开合的声门，待声门打开时将喷射头准确插入气管中，随后助手快速推进高压注射器使得ＢＬＭ雾化喷入气管中（５ ｍｇ／ｋｇ 的剂量溶于 ７５ μＬ 生理盐水中），给药结束后停留１ ～ ２ ｓ再缓慢退出喷射头，此雾化过程在１２ｓ内进行（见下图）。

博来霉素的剂量和浓度是影响模型成功的关键因素。传统方法中，剂量过高易导致小鼠急性肺损伤甚至死亡，过低则可能无法诱导出典型的纤维化病变。优化策略包括：

1.个体化剂量调整：根据小鼠品系、体重和健康状态，精准计算给药剂量。例如，C57BL/6 小鼠通常采用 5-7.5mg/kg 的单次滴鼻剂量，而 Balb/c 小鼠对博来霉素更敏感，剂量可适当降低。

2.分阶段给药：对于需要长期观察纤维化进展的实验，可采用 “低剂量多次给药” 策略，既能减少急性毒性，又能模拟纤维化的慢性进程。

通过高分辨率 CT 定期扫描小鼠肺部，可实时监测肺组织密度变化和纤维化程度，减少实验动物的使用量。

检测血清或支气管肺泡灌洗液（BALF）中的纤维化相关标志物（如胶原 Ⅲ、纤连蛋白），可更早地判断模型是否成功。