小鼠动脉瘤模型实验

一、实验背景

  动脉瘤，特别是腹主动脉瘤（AAA），作为老龄化社会的一种潜在致命性大血管疾病，其高致死率和缺乏有效药物一直是医学研究的难点。为了深入了解动脉瘤的发病机制，并寻找有效的干预靶点和治疗药物，研究者们构建了多种动物模型。其中，利用APOE小鼠通过皮下泵入血管紧张素II（Ang II）构建腹主动脉瘤模型是较为常用且有效的方法之一。

选用健康的8-10周龄雄性APOE基因敲除小鼠，体重在20-22g之间。APOE小鼠因载脂蛋白E（ApoE）基因被敲除，易出现高脂血症等特征，是研究心血管疾病尤其是腹主动脉瘤的理想模型。

血管紧张素II（Ang II），植入式微量渗透缓释泵，生理盐水，手术器械（眼科剪、止血钳、镊子、针线等），麻醉设备，MRI成像设备等。

①术前准备：小鼠术前禁食12小时，不禁水。手术前以3%异氟烷诱导麻醉，后俯卧固定于手术台，低浓度异氟烷维持麻醉。术前75%乙醇消毒并灭菌器械，小鼠剃毛后75%乙醇三消皮肤，术者戴无菌手套。

②手术操作：在耳下、前肢肩胛骨上方作1cm横向切口，撑开切口后用直止血钳作皮下通道，钝性分离皮下腔隙以备植泵使用。将含有Ang II的缓释泵植入空隙中，流量调节器不能朝向切口，泵应完全植入，皮肤无张力覆盖整个切口。植泵后夹切缝合，75%酒精消毒。小鼠置37℃保温板苏醒，观察小鼠至其完全恢复后放回笼中常规饲养。

③术后观察：术后12-24小时检查皮肤闭合状态及泵的位置，确保没有泵推挤切口的情况。若切口需要添加胶或泵突出，立即手术修复。术后第28天取出缓释泵。

MRI成像结果显示，模型组小鼠腹主动脉直径显著增加，且出现典型的动脉瘤形态学特征。组织学分析发现，病变动脉段出现弹性纤维断裂、平滑肌细胞耗竭和炎性反应增加等典型的AAA病变特征。此外，通过免疫组化染色观察到模型组小鼠腹主动脉壁中MMP-12等金属蛋白酶表达量明显升高，这与人类动脉瘤的发展过程相似。