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糖尿病早期视觉功能障碍动物模型

发布日期:2025-01-10


DM动物模型的建立方法:


1. 49-56天龄雄性C57BL/6小鼠,适应饲养3天。禁食4小时后,测定空腹血糖(FBG)和体重,标记小鼠。


2. 将小鼠随机分为STZ组和Vehicle组,STZ组按150mg/kg剂量腹腔注射STZ溶液,Vehicle组注射等量Vehicle溶液。注射日记为D0,STZ组注射后饮用10%葡萄糖水过夜。


建模鉴定:注射后3天起,每隔一定时间测定FBG和体重。STZ组注射后3天FBG>16.7mmol/L的小鼠视为建模成功,选取注射后28天(STZ-D28)的小鼠进行实验。




小鼠视网膜电图(F-ERG):


1. 将Vehicle组和STZ-D28组小鼠置于暗室适应12小时后称重,并在暗红光环境下腹腔注射1%戊巴比妥钠(50mg/kg)麻醉。


2. 麻醉成功后,将小鼠置于37℃加热板上,用托吡卡胺滴眼液散瞳,5分钟后用盐酸奥布卡因滴眼液行表面麻醉。


3. 打开电生理软件Retiscan,将针状电极插入小鼠双眼鼻侧皮下作为参考,铂金角膜环状电极固定于角膜表面记录,接地电极插入尾部皮下。


4. 连接电极后,调零并记录0.5log(cd·s·m−2;0dB)光强刺激下的0.1-300-Hz的F-ERG反应波形,每次刺激间隔至少1分钟。


5. 记录完毕后,将小鼠置于加热板上复苏,苏醒后送回动物房继续饲养。




小鼠视觉诱发电位(F-VEP)


小鼠准备与分组:选取49-56天龄雄性C57BL/6小鼠,分为STZ组和Vehicle组。STZ组腹腔注射150mg/kg STZ诱导I型糖尿病,Vehicle组注射等量柠檬酸缓冲液。


模型验证:从注射后第3天起,观察并记录小鼠的空腹血糖(FBG)、体重及多饮多尿现象。STZ组小鼠FBG显著升高,体重减轻,特征性糖尿病变化持续至第84天。


电生理检测:在D28(STZ-D28),将Vehicle组和STZ组小鼠置于暗室适应后称重,麻醉,置于加热板上。进行双眼散瞳和表面麻醉后,使用Retiscan软件记录F-VEP波形,记录电极插入颅骨,参考电极插入鼻上方皮下,接地电极插入尾部皮下。


复苏与饲养:电生理检测完毕后,将小鼠置于加热板上复苏,麻醉苏醒后送回动物房继续饲养。


结论:利用STZ成功构建I型糖尿病小鼠模型,高血糖状态维持至注射后84天。


                                                    

STZ-D28小鼠视神经传导功能和神经视网膜功能均下降




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