大小鼠抑郁行为评估实验顺序

抑郁症机制复杂，症状多样。科学家根据其核心症状，设计了大鼠小鼠的抑郁样行为实验，如糖水偏好实验（测快感缺失）、新奇环境摄食抑制与探索（测兴趣缺乏）、旷场、强迫游泳、悬尾和学习无助实验（测绝望行为）等。研究时应至少用其中两种方法，每种重复一次，且结果需同向或至少一次有统计学差异。选择动物模型时，应选两种或以上不同原理的模型，且至少两种模型显示改善作用并有统计学意义。

一、强迫游泳实验

Porsolt等在1977和1978年创建了强迫游泳实验，原理是让啮齿动物在无法逃脱的水中游泳，因厌恶水而挣扎，绝望后停止挣扎呈漂浮状态。此实验以游泳不动时间衡量绝望行为，常用于抗抑郁药物初筛及检测动物是否出现“抑郁样”行为。

 1. 实验准备

• 调节测试箱内水温至23~25℃。
  
  
• 根据动物体重调整水深，确保尾巴与箱底保持一定距离。
  
  
• 如同时实验多只动物，使用不透明挡板隔开。
  

2. 实验步骤

大鼠：实验前1天预游，24小时后正式实验，记录5分钟内的不动、游泳、攀爬时间。

小鼠：检测当天进行实验，游泳6分钟，记录后4分钟的相关时间。

3. 评价指标

不动时间：动物漂浮且几乎不动，时间越长表示抑郁程度越重。正常小鼠不动时间为检测时间的40%~80%，大鼠为30%~70%；与对照组相比显著增加（P<0.05）视为抑郁。

游泳时间：动物流畅协调地游动，时间和距离减少表示抑郁加重。

攀爬时间：动物四肢伸出水面剧烈上下动作，5分钟内SD大鼠正常攀爬时间为60~130秒，时间减少表示抑郁程度越重。

二、悬尾实验

1985年，Steru等人创立了悬尾实验，该实验通过悬挂小鼠尾巴使其头部朝下悬挂。初始时，小鼠会剧烈挣扎以试图逃脱这种不适状态，但挣扎无果后会进入不动状态，这被视为一种“绝望”表现。悬尾实验通过测量小鼠的不动时间来评估其绝望行为，是抗抑郁药物初步筛选及检测动物是否出现“抑郁样”行为的常用实验方法。

1. 实验步骤

固定小鼠：使用医用胶带将小鼠固定在金属磁铁棒上，确保小鼠呈倒立状态，头部与悬尾箱底面保持一定距离，避免小鼠触碰到仪器底部。

环境隔离：若同时进行多只小鼠实验，应用不透明挡板隔开，以减少相互干扰。

适应期：让小鼠适应倒立状态2分钟。

记录时间：实验总时长为6分钟，记录后4分钟内小鼠的活动情况，包括不动时间和运动挣扎时间。

2. 评价指标

不动时间：小鼠停止挣扎，身体保持垂直倒悬状态，静止不动。不动时间越长，表明抑郁程度越重。通常情况下，空白对照组（如C57小鼠）的不动时间均值可能大于100秒，而另一对照组（如ICR小鼠）的不动时间均值可能小于100秒。若实验小鼠的不动时间与对照组相比有显著性增加，则视为表现出抑郁行为。

运动挣扎时间：小鼠有明显可见的挣扎运动。运动挣扎时间越短，同样表明抑郁程度越重。

三、糖水偏爱实验

糖水偏爱实验是检测抑郁症快感缺失症状的经典方法，利用啮齿类动物对甜味的偏好，通过禁食后给予白水和低浓度蔗糖水，以蔗糖偏嗜度为指标评估快感缺失。该实验广泛应用于大鼠慢性应激模型，如Katz的慢性不可预知性应激模型和Willner的慢性温和应激模型，均首次采用此实验检测抑郁症状。此外，它也是研究抗抑郁药物起效速率的主要行为学检测方法之一。

1. 实验步骤

大鼠糖水偏爱实验：

训练期：单笼饲养大鼠，进行48小时蔗糖饮水训练。前24小时提供两瓶2%蔗糖水，后24小时一瓶蔗糖水，一瓶纯水（中途交换位置）。

禁食禁水：训练后，大鼠禁食禁水14~23小时。

测定期：测定1小时内大鼠对两瓶水的饮用量，计算糖水偏爱指数。

小鼠糖水偏爱实验：

训练期：与大鼠相似，但全程48小时均提供2%蔗糖水和纯水（中途交换位置）。

禁水：训练后，小鼠禁水（不禁食）9~18小时。

测定期：测定2小时内（中途交换位置一次）小鼠对两瓶水的饮用量，计算糖水偏爱指数。

2. 评价指标

评价指标应采用蔗糖偏嗜度(sucrose preference)作为评价指标,蔗糖偏嗜度(%)=蔗糖水饮用量/(蔗糖水饮用量+饮用水饮用量)×100%。

四、实验顺序选择

在抑郁行为评估中，实验顺序因实验室而异，并不固定。一种建议是根据应激程度从小到大进行，如先糖水偏好实验，后强迫游泳和悬尾实验。但研究表明，顺序并非绝对，可灵活调整。需注意的是，高应激实验（如强迫游泳、悬尾）不宜同日进行，至少间隔一天。而无论先做哪个，当天均可进行糖水偏好实验的适应过程。关键在于通过预实验确定最适合的顺序，并保持一致。

更多服务咨询请致电：

15001394959

15555144551

17666664644

导科医药竭诚为您服务