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糖尿病神经痛大鼠模型
发布日期:2024-11-25
糖尿病神经痛大鼠模型
链脲佐菌素(STZ)因其操作简便且成本效益高,在制备糖尿病神经痛动物模型的基础研究中得到了广泛应用。STZ作为一种具有细胞毒性的葡萄糖类似物,能够借助GLUT2葡萄糖转运体被胰岛β细胞摄取,进而引发DNA损伤及细胞凋亡,最终导致胰岛素分泌减少,诱发高血糖状态。
一、配制STZ溶液
1. 将精确称量的STZ粉末转移至一个覆盖有铝箔以保持避光的无菌锥形试管内,并向其中加入足量的pH值为5.5的柠檬酸钠缓冲液,以确保最终溶液的浓度为50毫克/毫升。
2. 通过充分搅拌,确保STZ完全溶解于缓冲液中。
3. 将配制好的STZ溶液存放在暗处,且存放时间不宜超过15至20分钟,因为STZ在柠檬酸钠缓冲液中会迅速降解,并且对光线敏感。
此外,为了减轻STZ溶解胰腺岛细胞后可能引发的急性低血糖反应,给予大鼠蔗糖水饮用可以提供一定的保护作用。
二、造模方法
经过一周的适应性饲养后,所有大鼠需进行12小时的禁食处理,随后接受腹腔注射,剂量为每公斤体重35毫克的链脲佐菌素。注射后的第三天起,开始通过血糖分析仪检测大鼠尾静脉的血糖水平。若大鼠的空腹血糖持续超过16.7毫摩尔/升,并维持这一状态两周,则判定为糖尿病神经痛模型构建成功。
在治疗开始前、治疗第七天和第十四天,通过剪取大鼠尾尖采集尾静脉血,使用血糖仪测量并记录空腹血糖(FBG)水平。此外,在STZ注射后的72小时以及之后的每周,都会定期测量大鼠的体重和血糖水平,以此来确认糖尿病高血糖症状的起始和持续状态。
三、行为评估
机械痛觉过敏评估:此测试旨在检测大鼠对通常非伤害性轻微刺激(如触碰或压力)的异常疼痛反应。测试时,将大鼠置于高度为20厘米的金属网格平台上,利用刺激器对大鼠足底施加预设压力,直至大鼠因疼痛而缩回爪子,此时记录为痛觉阈值。整个过程重复三次,取平均值作为最终结果。此外,还使用不同弯曲强度的纤维丝轻柔触碰大鼠足底,以记录其撤回反应的阈值。值得注意的是,糖尿病大鼠往往表现出较低的撤回阈值。
热痛觉过敏测试:此测试用于评估大鼠对热刺激的敏感性增强,即通常可耐受的温度现在引起疼痛反应。测试时,将大鼠置于预热至55℃的热板上,记录其抬起受影响足爪的时间。糖尿病大鼠通常会表现出较短的撤回时间,表明其对热刺激的疼痛反应增强。
冷痛觉过敏评估:此测试通过干冰或冷水浸泡的棉签轻柔触碰大鼠足底,以观察并记录其反应时间,从而评估大鼠对冷刺激的异常疼痛反应。
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