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小鼠骨折模型
发布日期:2024-10-30
小鼠骨折模型
一、背景介绍
骨损伤模型主要分为皮质孔、三点骨折和阶段性骨缺损三类。骨折动物模型研究始于19世纪末,早期使用大型动物,后转向小型哺乳动物,尤其是小鼠,因其基因明确、抗体资源丰富、体型小、操作简便且易于麻醉。小鼠骨折模型广泛应用于骨生物学、再生、疾病治疗研究及药物、材料筛选。鉴于传统方法仍为主流,本文重点介绍传统骨折模型及其修复方法,供读者参考创新。
二、解剖学基础
三、器械材料与实验动物
器械材料:牙科钴,4-0带线缝合针,自制0.25mm髓内针(由针灸针制备),眼科镊,球形钻头,圆片钻头,眼科剪。
实验动物:BALB/c小鼠,6~8周龄,性别不限。
四、造模方法
以后肢骨为例,分别介绍股骨骨折模型和胫骨骨折模型的建立。
1.股骨骨折模型
(1)小鼠常规麻醉。
(2)大腿外侧备皮,侧卧位固定,大腿外侧常规消毒。
(3)沿股骨将皮肤剪开1cm,暴露股内侧肌和膝关节。
(4)在股骨中段沿着股直肌、股内侧肌、股外侧肌和股中间肌之间分界线钝性分离肌肉,暴露并游离出股骨5mm。
(5)在股骨长轴的中间位置用牙科钻配置圆片钻头锯断股骨,边锯边在切口处滴加预冷生理盐水降温。
(6)用球形钻头沿着股骨长轴从股骨远心端钻通骨髓腔,随即拔出,完成内针进入髓腔的通道。进钻深度约3mm。
(7)将髓内针沿着通道进入骨髓腔连接并固定锯断的股骨,使股骨断面紧密接触。
(8)髓内针前端抵达骨髓腔前端,髓内针在股骨远心端外弯曲 90°后剪断,保留1mm弯曲段。
(9)用牙托粉封堵膝盖处的空隙。缝合手术皮肤切口。
2.胫骨骨折模型
(1)小鼠常规麻醉,小腿备皮,仰卧位固定。
(2)沿着胫骨长轴中线剪开皮肤,暴露胫骨和膝关节,保留髌骨和髌骨悬韧带。
(3)在胫骨中段沿着胫前肌和腓肠肌的缝隙钝性分离肌肉,暴露并游离胫骨。
(4)将镊子插入胫骨下,充分分离胫骨,制作切割空间。
(5)在胫骨长轴的中线位置用牙科钻配置圆片钻头锯断胫骨,边锯边在切口处滴加预冷生理盐水降温。
(6)用球形钻头在膝盖处从胫骨近心端沿着胫骨长轴钻通骨髓腔,制作内针通道。
(7)将髓内针沿通道进入骨髓腔,直抵远心端。连接并固定锯断的胫骨,使胫骨断面紧密接触。
(8)髓内针在胫骨近心端外弯曲 90°后剪断,保留1mm 弯曲段。
(9)用牙托粉封堵膝盖处的空隙。缝合手术皮肤切口。
五、模型评估
(1)手术效果:检查骨折对合、髓内针固定及软组织损伤情况。
(2)影像学:用X线、CT或MRI评估骨折及愈合程度。
(3)组织学:染色检查骨折部位的细胞分布和数量。
(4)生物化学:检测骨骼生长因子和细胞因子的表达。
(5)功能性:通过行为学和运动学评估功能恢复情况。
六、注意事项
(1)小鼠股骨短,钝性分离股直肌时选中段以增操作空间。
(2)胫骨易锯但也易断,需谨慎。
(3)锯骨时滴加预冷生理盐水降温,防骨切面坏死。
(4)髓内针需固定好断骨,确保切面紧密连接。
(5)暴露股骨远心端及固定髓内针时,避免伤髌骨悬韧带。
(6)选0.25mm不锈钢针或针灸针,硬且不易弯,X线摄影无大伪影。
(7)髓内针固定影响膝关节运动,观测骨愈合时需考虑。
(8)不锈钢针或针灸针优于注射器针头,因后者易污染。
(9)髓内针末端可留骨外便于取材,或完全埋入并用牙托粉封闭髓孔以减少功能损伤。
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