心肌缺血再灌注动物模型构建与评价

一、动物制备

1.为确保手术安全，手术前需对大鼠实施12小时的食物与水剥夺，此举旨在预防手术过程中发生肺误吸的风险。

2.手术前，所有手术器械均经过高压蒸汽灭菌处理，以确保手术环境的无菌状态。

3.采用腹膜内注射方式给予大鼠戊巴比妥钠麻醉剂（浓度为1.5%，剂量为75mg/kg），以确保手术顺利进行。

4.通过夹脚趾测试评估麻醉效果，具体操作为：使用镊子轻夹大鼠后爪，若未见反射动作，则视为麻醉充分。

5.准备手术材料：将两个回形针中间部分拉直并弯曲成“S”形，随后将“S”的宽端部分拉下，制作成小型固定器。同时，截取7mm长的2mm直径聚氯乙烯（PVC）管段，并在管内穿入一根10cm长的4-0缝合线，两端牢固打结。

6.手术操作：使用6-0缝合线将左前降（LAD）冠状动脉与准备好的PVC管紧密连接。为确保缝合线稳固不脱落，在PVC管中部切割一小凹槽，并通过此凹槽将缝合线穿过管子进行固定。

二、手术程序

按照以下步骤进行手术以生成的MIRI大鼠模型

1.麻醉后，将大鼠仰卧固定，剃除并清洁左前胸部毛发。

2.左侧胸骨旁纵行切开皮肤及皮下，暴露第三、四肋间胸膜。

3.经口插入吸刺器，机械通气维持呼吸。

4.剑突至左二肋间隙间做切口，分离肌肉进入肋间隙。

5.在第三、四肋骨间横向切开，必要时切除第四肋骨以暴露心脏。

6.使用生理盐水棉球保护肺部，解剖心包，定位冠状动脉口。

7.使用手术缝合线将左前降支（LAD）与PVC短管连接并固定，诱发缺血并记录变化。

8.缺血45分钟后，夹闭胸部并覆盖伤口，松开连接以开始再灌注。

9.再灌注期间维持麻醉2小时。

按照先前发布的程序进行手术以生成大鼠模型16

1.在结扎LAD冠状动脉之前，执行与实验模型组相同的步骤。

2.在缺血期间，仅在与实验模型组相同的位置使用6-0手术缝合线用滑结结连接每只大鼠的近端LAD冠状动脉，并打一个滑结45分钟。

3.结扎后，用镊子松开滑结，用缝合针和镊子缝合大鼠的切口，并在整个再灌注期间保持动物处于1.5%舒泰的深度麻醉状态在收获老鼠的心脏之前2小时。

三、结果

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