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哨兵鼠:守护实验动物健康的“哨兵”
发布日期:2024-08-02
哨兵鼠:守护实验动物健康的“哨兵”
一、哨兵鼠介绍
哨兵鼠,作为外来健康小鼠,被精心引入关键繁殖群,它们或是直接接触,或是通过脏垫料间接监测饲养区域,成为病原微生物的敏锐探测器。这些未受特定病原侵扰、年龄超4周的健康小鼠(免疫缺陷除外),如ICR、BALB/c等品系,每2-3只一组,被安置在笼架末端,守护着60-100笼的同伴。
它们生活在其他小鼠用过的脏垫料中,至少4周,每笼约30-50克,以此模拟并检测环境病原。遵循国标,每三个月一检,哨兵鼠在不干扰实验动物日常的同时,默默守护着整个群体的健康,确保实验结果的准确性和可重复性。它们是实验动物质量标准化的关键一环,是科研路上不可或缺的隐形卫士。
二、哨兵鼠的分类
1. 直接接触哨兵鼠
- 优势:哨兵鼠与被监测鼠同笼饲养4周,全面暴露于微生物和寄生虫,能检测多种传播途径的感染,确保监测全面。
- 局限:需一对一监测,成本高昂,仅适用于少量动物,实际应用受限。
2.脏垫料哨兵鼠
- 优势:以少量哨兵鼠监测多笼动物,成本较低,监测效果与成本间取得良好平衡,广泛应用。
- 操作:设置于回风位,每笼2-3只哨兵鼠,用50%-100%脏垫料混合,减少稀释以提高检出率。
- 局限:对气溶胶、直接接触传播的病原体监测效果有限,存在漏检可能;需至少四周暴露期,不适用于紧急检疫。
3.废气哨兵鼠
第一种:
- 优势:高效监测气溶胶传播病原体:该方法能够直接暴露哨兵动物于废气中,显著提高通过气溶胶途径传播的病原体的检出率,从而改善整体监测效果。
- 全面监测:通过持续一个月的暴露时间,确保哨兵动物有足够的时间感染可能存在的微生物,提高了监测的全面性和准确性。
- 劣势:成本与技术门槛高:需要额外使用特殊的哨兵笼通风装置,增加了设备成本和安装难度,限制了该方法的广泛应用。
- 操作复杂性:相比传统监测方法,该方案在操作和维护上可能更为复杂,需要更多的技术支持和人员培训。
- 空间限制:特殊通风装置的安装可能受到实验室空间布局的限制,不适用于所有设施。
第二种:
优势:
- 时效性强:最快一周内可检出病原体。
- 检出率高:低感染比率下也能成功检测。
- 非侵入性:无需额外生物体,符合伦理。
劣势:
- 设备依赖:初期投入成本较高。
- 范围局限:可能不如哨兵鼠全面。
- 结果解读复杂:需专业人员解读PCR结果。
- 长期成本:频繁监测可能累积较高费用。
不过,这种方法也并非完美,在使用前,有几个问题需要了解:
(1)笼盒设计影响EAD监测:空气若先过滤后排,则EAD无法有效检测病原体核酸。
(2)通风管道清洁不彻底,EAD监测或现假阳性。
(3)EAD样本外送检测成本高,但确保结果可靠。
三、采样指南
1. EHM方案的采样方式
EHM作为哨兵鼠方案补充,提升监测灵敏度,减少动物使用及成本。无菌拭子、采样卡等采样方式便捷标准化,广泛用于欧美。近年,植绒拭子入脏垫料盒采样法亦受青睐,兼容各笼具设计,防假阳性。无论何种方式,PCR检测高敏性确保微量核酸精准识别,EHM趋势渐强,或取代哨兵鼠方案。
2. 检测结果的准确性
综合分析33篇文献,EHM检出率(96%)显著高于脏垫料哨兵鼠(76%)。EAD样本能准确检出多种病原体,包括脏垫料方案易漏检的如仙台病毒、嗜肺巴斯德杆菌等,但轮状病毒、链球菌等病原体检出效果尚存争议。
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