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牙周炎动物模型构建

发布日期:2024-07-30

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牙周炎动物模型构建

       牙周炎,作为口腔复杂病症,逐步侵蚀牙龈、牙周韧带及牙槽骨,是牙齿脱落的元凶。小鼠模型通过植入金属丝模拟牙周炎环境,再现其病理过程,为研究其发病机制、细菌与免疫互作等提供平台。此模型不仅助力评估治疗策略,筛选创新疗法与药物,还探索牙周炎与心血管疾病、糖尿病等全身性疾病的潜在联系,旨在开发更加高效的牙周炎治疗方案,促进口腔健康与整体健康的关联研究。

一、小鼠口腔局部解剖

屏幕截图 2024-07-30 102239

  • 1. 舌头
  • 2. 下门齿
  • 3. 左上前臼齿
  • 4. 硬腭
  • 5. 上门齿
  • 屏幕截图 2024-07-30 102328
  • 1. 左下后臼齿
  • 2. 左下中臼齿
  • 3. 左下前臼齿
  • 4. 舌
  • 5. 下门齿
  • 6. 右下后臼齿
  • 7. 右下中臼齿
  • 8. 右下前臼齿

  • 二、主要器械材料
  • 屏幕截图 2024-07-30 102451
  • 三、造模步骤
  • 1. 小鼠注射麻醉后,仰卧位固定
  • 2. 固定上、下门齿,使之保持张口状态。
  • 3. 用左手拇指和食指拉出舌头,充分暴露上颌前臼齿与中臼齿间隙。
  • 屏幕截图 2024-07-30 102531
  • 4.右手持眼科镊夹住正畸丝头端后2mm处,完全插入前臼齿与 中臼齿内侧牙根之间的缝隙,然后再插入3mm。
    屏幕截图 2024-07-30 102609
  • 5. 用眼科镊于腮与臼齿之间,夹住正畸丝向外拽出,使正畸丝在臼齿两侧的长度相等。
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  • 6. 左手松开小鼠的舌头,用眼科镊将正畸丝向前压入牙龈沟,右手持止血钳夹住左上前齿两侧的正畸丝旋转,形成环绕扣。
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  • 7. 用正畸丝剪剪掉较长的正畸丝,保留3mm。
  • 8. 完成手术,4周后成膜。

  • 四、模型评估

目前流行的模型评估方法主要包括以下几种:


(1) 牙周炎指数评估: 使用特定的牙周探针对小鼠上颌第二双臼齿龈沟处进行探针深度测量,记录探针深度和与牙龈边缘之间的距离,根据探针深度和与牙龈边缘之间的距离的比例计算得出牙周炎指数,用于评估牙周炎的严重程度。


(2) 免疫组织化学评估: 通过免疫组织化学技术,检测小鼠牙周炎组织中的细胞因子、炎症介质等免疫相关分子的表达水平,以评估小鼠免疫系统在牙周炎过程中的参与程度。


(3) 血清生化指标评估: 测定小鼠血清中的炎症因子、抗氧化酶、细胞因子等生化指标,以评估小鼠在牙周炎发生过程中的生化代谢变化。


(4) 组织病理学评估:  采用组织切片染色,对小鼠牙龈下软组织、颌骨、牙周膜、根尖等进行病理学分析,评估小鼠牙周炎病理变化的程度和类型,例如,炎症细胞浸润、牙周组织损伤、骨质吸收和新骨生成等。

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五、讨论

(1) 结扎白齿的环绕扣的留存长度不宜过短,至少需要留存3mm。环绕扣留得太短,正畸丝容易松开;留得太长,应在断端套硅胶管,避免造成小鼠口腔损伤。


(2) 止血钳夹住臼齿两侧的正畸丝向一个方向旋转时,需要保持正畸丝是抻直的状态否则不利于臼齿的结扎,会导致模型失败。


(3) 结扎白齿之后,用眼科镊夹住正畸丝的环绕扣向上抬起,观察臼齿是否结扎

好。


(4) 有些造模方法是先结扎臼齿,然后在臼齿上涂抹菌液。为了让更多的菌液黏附在臼齿上,可以在结扎之前,在舌侧的正畸丝上缠绕棉线,结扎臼齿后剪掉多余的棉线,再涂抹菌液时会有更多的菌液黏附在棉线上,有利于造模。


(5) 术后在结扎的臼齿上涂抹菌液时,气体麻醉为首选。一般是多次涂菌液,用吸入麻醉系统麻醉小鼠非常安全方便,脱离异氟烷麻醉到苏醒的时间为1~2min,足以在小鼠的牙齿上涂菌液。


(6) 用结扎臼齿的方法做牙周炎模型,结扎臼齿的牙槽骨会有损伤。



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