基因选择与设计：根据研究目的，选择与骨质疏松相关的目标基因，如雌激素受体基因、骨保护素（OPG）基因、Runx2基因等。设计合适的基因敲除、过表达或突变策略。

2、基因修饰

构建基因修饰载体：利用CRISPR/Cas9、TALENs或ZFNs等基因编辑技术，构建含有目标基因特异性识别序列的载体。

显微注射：将构建好的基因修饰载体显微注射到实验鼠的受精卵中，实现基因的整合和修饰。

胚胎移植：将注射后的受精卵移植到代孕母鼠的子宫内，待其发育成新生小鼠。

3、模型验证与筛选

基因型鉴定：通过PCR、测序等方法鉴定新生小鼠的基因型，筛选出成功实现基因修饰的小鼠。

表型观察：观察并记录小鼠的生长发育情况，包括体重、骨骼形态等。

骨密度测量：使用X射线、双能X射线吸收测定法（DXA）或定量CT（QCT）等技术测量小鼠的骨密度，评估骨质疏松程度。

骨组织学分析：取小鼠的骨骼组织进行病理学检测，观察骨小梁结构、骨细胞形态等变化。

4、后续实验与观察

生化指标检测：检测小鼠血液中的钙、磷、碱性磷酸酶等生化指标，评估骨代谢状态。

药物治疗与评估：对模型鼠进行药物治疗，观察并记录治疗效果，评估药物的疗效和安全性。

长期观察：对模型鼠进行长期观察和记录，包括行为学测试、生存曲线分析等，以全面评估骨质疏松的病理变化和治疗效果。

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