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眼科类疾病模型 —— 青光眼造模

发布日期:2024-07-03

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眼科类疾病模型之青光眼造模 

       眼科类疾病模型主要包括人源化小鼠模型、基因编辑小鼠模型等,这些模型通过模拟人类眼科疾病的发生fa展过程,为眼科疾病的发病机制研究、药物靶点研究以及治疗效果评价等方面提供了重要支持。

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一、模型应用

青光眼是眼科的一种常见病,其病因复杂。该病分为几种类型,原发性青光眼中最多见的是开角型青光眼和闭角型青光眼。这两类疾病都是房水排出障碍,导致眼内压增高,血液灌注差减小,眼内供血不足,最终因视神经受损而失明。

构建小鼠眼压升高的青光眼模型,可用于研究高眼压对眼的损伤机制和测试降眼压药物的疗效。

青光眼的造模方法有很多种,如基因诱导、激素诱导、自体血细胞前房注射、乳胶微球前房注射、上巩膜静脉(episcleral vein)电烧等。各种模型的致病机理不同,操作难易程度也不同。

今天介绍上巩膜静脉电烧法(episcleral vein cauterization,EVC)制作小鼠青光模型。这个模型的优点是所需材料少,对眼球内无直接机械损伤,但要求术者必须具备一定的显微手术技术和小鼠眼部解剖知识。


上巩膜静脉电烧法

  1. 器械材料与实验动物


     2.手术流程

以右眼为例介绍造模方法:


(1)小鼠常规注射麻醉。左侧卧于手术台,胶带固定头部,头部垫高。


(2)剪除术眼睫毛,角膜滴生理盐水。


(3)使用显微剪沿颞侧角膜缘将球结膜仝部切开。


(4)用镊子夹住结膜控制眼球位置,暴露上巩膜静脉外支。


(5)使用显微镊分离上巩膜静脉外支。

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(6)轻度张开镊子,用电烧灼器缓慢烧焦后烧断外支。(如下图)


(7)使用同样方法烧断上巩膜静脉外下支和下支,保留上巩膜静脉上支。


(8)将球结膜复位,不必缝合球结膜切口。术眼涂抹抗生su眼药膏。


(9)保温复苏后返笼,单笼饲养,正常饮食。

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二、模型评估

小鼠青光眼模型通常用于研究青光眼的发病机制以及测试新的治疗方法,评估这种模型的有效性和临床相关性至关重要。常用的小鼠青光眼模型评估方法包括以下几种。


(1)大体检查:术后虹膜血管明显迂曲充盈(如下图)。


(2)眼内压(intraocular pressure,IOP)测量:青光眼的一个主要特征是眼内压升高通过使用专业的眼内压测量仪,可以定期测量小鼠的眼内压(如下图),以跟踪模型的发展和治疗效果。


(3)视觉功能评估:使用电生理学方法,如视觉诱发电位(visual evoked potentials,VEP),可以评估小鼠的视觉功能是否受损。


(4)组织病理学分析:通过组织切片染色,观察小鼠眼部组织的病理变化,如视网膜层的退化、神经节细胞的死亡等。


(5)行为学测试:有时青光眼可能会对小鼠的行为产生影响,如出现视觉障碍。


以上方法合理联合使用,可以更全面地评估小鼠青光眼模型效果。

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三、讨论

(1)上巩膜静脉电烧时,用镊子挑起静脉并分开,提供电烧空间。


(2)每3mim 在角膜上滴1次生理盐水,防止因干燥损伤角膜。


(3)使用冷光源保护小鼠角膜免受热灼伤。


(4)若要保留1支上巩膜静脉分支,建议保留上支,可以使切开球结膜范围最xiao


(5)烧断外支,能更有效地阻止静脉血回流,因为其直接汇入眼眶静脉窦。


(6)上巩膜静脉被阻断的支数和血管的选择,应根据具体研究目的、小鼠种类以及预实验结果来确定。



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