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大鼠腹主动脉瘤造模

发布日期:2025-02-17



当前,诱导腹主动脉瘤并建立相应的动物模型,主要采用物理化学手段或基因技术。其中,Anidjar所提出的弹力蛋白酶腔内加压灌注技术,作为最常用的建模手段之一,能够模拟腹主动脉瘤形成过程中细胞外基质中弹力蛋白的降解机制。





一种常见的做法是利用氯化钙来触发动脉壁的炎症反应,以此构建动脉瘤的动物模型。然而,这种方法的有效性并不理想。据Isenburg等人的研究指出,即便采用动脉扩张20%作为动脉瘤形成的判定标准,其成功率也仅达到66.7%。为了改进这一状况,本研究采取了优化策略:对传统腔内弹力蛋白酶灌注技术进行了改良,并结合氯化钙的应用,旨在减少弹力蛋白酶的使用量及其灌注时长,进而降低动物的死亡率。通过这种方式,我们成功建立了更加贴近人类腹主动脉瘤发病机理及病理生理特征的动物模型。



造模方法


在大鼠腹主动脉瘤模型构建中,主要采用的是弹力蛋白酶灌注法,这一技术模拟了腹主动脉瘤形成过程中细胞外基质弹力蛋白的降解,从而诱导动脉瘤的形成。


实验动物选择与准备:选用体重在200至300克之间的成年SD大鼠作为实验对象,性别对此无特定要求。术前,大鼠需禁食以减少手术过程中的误吸风险,但不禁水。


麻醉与体位固定:使用硫喷妥钠等麻醉剂对大鼠进行全身麻醉,麻醉剂量需根据大鼠的体重进行精确调整。之后,将大鼠腹部剃毛备皮,并以仰卧姿势固定在手术台上,确保尾部朝向操作者,便于后续操作。


弹力蛋白酶灌注法:在麻醉和固定完成后,通过特定的手术步骤,将弹力蛋白酶灌注至大鼠的腹主动脉内,以模拟腹主动脉瘤的形成过程。



手术操作


沿腹部中央线切割一个大约6厘米长的切口,依次切开皮肤层、肌肉层和腹膜,以进入腹腔内部。随后,利用棉签、显微镊等精细手术工具,小心地将肾下方的腹主动脉从周围组织中分离出来。分离过程向上延伸至左肾静脉的位置,向下则到达腹主动脉分叉的区域,并同时游离出左侧髂总动脉的一部分(长度约为5至10毫米)。



结扎左髂总动脉远端,近端及腰动脉、左肾静脉下方预留线。用含肝素钠生理盐水的24G留置针穿刺左髂总动脉,退针芯后检查血管封闭性。确认后,抽出液体,注入弹力蛋白酶,加压灌注约30分钟(注意长时间灌注可能增加术后死亡率)。



沿腹部中央线切割一个大约6厘米长的切口,依次切开皮肤层、肌肉层和腹膜,以进入腹腔内部。随后,利用棉签、显微镊等精细手术工具,小心地将肾下方的腹主动脉从周围组织中分离出来。分离过程向上延伸至左肾静脉的位置,向下则到达腹主动脉分叉的区域,并同时游离出左侧髂总动脉的一部分(长度约为5至10毫米)。



术后处理


灌注完成后,拔除留置针,紧固髂总动脉的活结,并解开2号及1号线。随后测量血管直径,并将小肠和盲肠复位至腹腔,逐层关闭腹部切口。待动物苏醒后,转移至饲养区进行观察。术后14日,对动物进行解剖,再次测量弹力蛋白酶灌注部位的血管直径,若直径较术前增大超过150%,则视为造模成功。




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