啮齿动物机械痛阈检测

一、SNI小鼠模型制备

小鼠称重后，用异氟烷麻醉并俯卧固定。剃除左后肢皮毛，消毒并做1cm切口于股骨大转子与腔骨头连线中点上方，分离组织暴露坐骨神经及其分支。结扎并切断腓总神经和腓肠神经（保留胫神经），缝合伤口并注射青霉素防感染。神经病理性疼痛模型组和100Hz电针组进行SNI造模，假手术组仅暴露神经不做结扎切断。

二、实验动物分组及处理

建模前5天，每天测量小鼠的机械缩足反应阈值以确定基础阈值，并剔除异常小鼠。随后，将建模组小鼠随机分为SNI组、SNI-PA组、SNI-PI组、SNI-PC组和SNI-NS组。

对照组小鼠分为CON组、CON-NS组和CON-PI组。SNI模型建立5天后，确认痛阈降低，开始给药处理。

每天9:00至12:00给药一次，持续至建模15天。鞘内注射5μl葛根素（4μg/μl），腹腔注射0.5ml葛根素（100mg/kg）。

生理盐水组与SNI-PI组注射时间和剂量相同。排除建模失败、自噬、感染、瘫痪等影响因素后，各组最终保持5只小鼠。

三、检测指标

(1)行为观察：建模后每天观察小鼠左足畸形变化。

(2)机械痛阈检测：采用von Frey丝法，在特定环境下测量小鼠左后足机械缩足阈，记录并计算50%MWT。测量时间为9:00am-5:00pm，测量前进行适应性训练。检测时间点为造模前、造模后7d和14d。SNI建模组小鼠左足畸形明显，行走受影响。给药后，SNI-PC组和SNI-PI组小鼠症状有所改善，SNI-PA组和SNI-NS组无明显改善。

(3)脊髓背角促炎症因子检测：提取各组小鼠患侧脊髓背角，通过RT-qPCR检测IL-1β。SNI建模组小鼠行为明显异常，给药后SNI-PC组和SNI-PI组症状有所缓解。

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