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大鼠肾移植模型构建

发布日期:2024-11-15

大鼠肾移植模型构建


前言:尿毒症患者的首选治疗方式目前为肾移植。鉴于临床试验存在诸多限制,构建恰当的肾移植动物模型对于推进肾移植相关的基础研究与应用研究具有重要意义。


一、造模方法

在构建大鼠肾移植动物模型的过程中,大鼠肾静脉的薄壁脆弱性和输尿管的细小弯曲特点,常常使得静脉连接和尿路再造成为关键且具挑战性的步骤,这些因素时常会拖延甚至阻碍整个实验流程。然而,经过不断的探索与技术革新,现在已成功运用动脉与静脉的端对端吻合技术,以及输尿管的端对端吻合方法,建立起了稳定且可靠的大鼠肾移植模型。


二、实验动物的选择

无特定病原体(SPF)级Wistar雄性大鼠,体重250~300g。供受鼠均为Wistar大鼠。


三、模型的建立方法

1.供肾切取


为麻醉大鼠,采用腹腔注射方式给予其1%戊巴比妥钠,剂量为10ml/kg。随后,对大鼠进行备皮消毒,并使其仰卧,于腹部正中线切开皮肤及肌肉,进入腹腔时需避免损伤肠道。接着,打开后腹膜,向血管内滴注约1ml的2%利多卡因,以保持血管湿润并减轻游离过程中的痉挛。使用显微镊游离输尿管时,需保留伴行血管,并在肾下极2cm处斜行剪断。游离肾脏至近肾门处,保留少量肾周脂肪组织。游离肾动脉及肾静脉至近肾门,结扎分支血管。全身肝素化后,于腹主动脉处放置预置线并阻断,剪断左肾静脉。以留置针穿刺腹主动脉,注入4℃肝素生理盐水直至肾脏颜色苍白,总量约5ml。最后,离断肾动脉,取下肾脏,并置于冰上的肝素生理盐水中保存。


2. 供肾移植

按照供鼠的操作步骤,将受鼠的肾脏游离并暴露,结扎肾上腺、性腺血管等分支,游离左肾动脉、肾静脉,并在肾门下约1cm处结扎并斜行剪断输尿管。随后,移除受鼠的左肾,并用肝素生理盐水冲洗残端。将供肾放入自制的带洞肾袋中,使血管和输尿管从洞口露出,保持肾脏低温。采用11-0带针缝线进行肾动脉和肾静脉的吻合,先吻合肾动脉,后吻合肾静脉,各缝合数针以确保吻合牢固。完成后,通过阴茎背静脉注入含青霉素钠的温生理盐水,观察血管通畅情况。如血管通畅,则剪开肾袋,开放肾门处血管夹,观察肾脏灌注情况。最后,进行输尿管端端吻合,切除右侧肾脏,检查腹腔无出血后,缝合肌肉和皮肤,手术完成。整个手术过程需保持细致操作,确保吻合口无渗漏,肾脏灌注良好。



三、结果

一般认为,大鼠失去双侧肾脏24小时内将死亡,因此,选择术后3天为界限,判断肾移植是否成功。


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