肾缺血再灌注

一、模型应用

小鼠肾缺血再灌注损伤（Renal IRI）模型是模拟肾血液灌注不足导致组织损伤的重要工具，广泛应用于：

（1）肾疾病研究：探究急性肾损伤、肾小管损伤等机制。

（2）肾移植研究：模拟移植手术中的再灌注损伤，评估移植后肾功能。

（3）药物筛选：测试药物对肾缺血再灌注损伤的保护作用，寻找治疗策略。

（4）免疫炎症研究：研究免疫炎症与肾损伤的关系。

此模型为肾相关疾病研究和新治疗策略的发现提供了关键实验基础。

二、器械与材料

保温手术板，4-0带线缝合针，打结镊，眼科镊，眼科剪，动脉血管夹，持针器。

三、造模方法

(1)小鼠常规麻醉，背部及左、右腹侧剃毛。

(2)俯卧位固定，剃毛区消毒。

(3)平肋后缘、背部正中做皮肤切口(图 26.2)。

(4)取右侧卧，将背部皮肤切口移向左腹、距左肋后缘5mm(图 26.3，图 26.4),做腹壁切口(图 26.5 )，切口长度5 mm。

(5)找到左肾并压出体外，将肾偏向腹侧，找到并分离左肾动脉，动脉下穿线备用。

(6)小鼠取左侧卧位，同样将背部皮肤切口移向右肋后缘。

(7)靠近背侧做腹壁切口，切口长度5mm。

(8)找到右肾，并挤出体外，将右肾翻向腹侧。

(9)暴露右肾动静脉，分离右肾动脉，动脉下穿线备用。

(10)将打结镊斜向上方牵拉右肾静脉，使静脉扁平并偏向一侧。

(11)然后从对侧用微血管夹夹闭右肾动脉和部分右肾静脉，可以观察到右肾逐渐变为淡黄色，呈缺血状态，然后将右肾复位。同样完成左肾动脉夹闭。

(12)在完成两侧肾动脉夹闭后，开始计时。小鼠分组，分别在30、45、60min后撤除血管夹，肾动脉血流恢复，缺血期间需要维持小鼠正常体温。

(13)肾动脉再通后，逐层缝合手术切口。

(14)待小鼠保温苏醒后，放回鼠笼中饲养

(15)术后 24h，采血样，小鼠安乐死。

(16)采集病理标本并固定于 4% 多聚甲醛中。

四、模型评估

(1)肾功能评估:采血样分离血清后，检测血清尿酸与肌酐。

(2)组织学评估:取肾标本于4%多聚甲醛中固定 24h后进行病理切片，H-E染色观察组织形态变化。

五、讨论

(1)分离肾动脉时需要注意轻柔操作，避免损伤肾静脉。

(2)采用血管夹夹闭肾动脉和部分肾静脉的方法使肾血管缺血，其优点是便捷快速且不容易损伤肾静脉;缺点是容易造成部分肾淤血，从而影响肾缺血模型的效果。

(3)手术切口的选择:根据小鼠松皮特点，背部皮肤切口可以迁移到两侧手术部位。手术完成后，皮肤可以同时有效覆盖在两侧的手术切口，有效防止腹壁切口暴露，术后能更好地防止腹壁切口感染。一个皮肤切口可减小手术损伤。

(4)在靠近背侧做腹壁切口的优点:容易暴露肾，靠近肾夹闭肾动脉只会造成肾缺血，且不伤及肠管和肾前腺。

做腹部正中切口的缺点:夹闭肾动脉的操作容易损伤肠管以及肠系膜，此外若是靠近腹主动脉夹闭肾动脉，会造成肾前腺与肾同时缺血。

(5)可以比较在不同缺血时间、相同再灌注时间小鼠血清中尿酸、尿素氮以及肌酐水平的差异和肾组织切片上肾组织形态的改变。

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