骨质疏松动物模型（一）

       骨质疏松是一种全身性骨病，主要特征为骨密度和骨质量下降，导致骨微结构损害，骨脆性增加，易于发生骨折。其常见原因包括内分泌紊乱、不良生活方式、药物影响、消化吸收问题等。骨质疏松不仅影响呼吸功能，还可能导致驼背、疼痛和骨折等严重并发症。

一、去势造模法

1.药物去势法

实验鼠骨质疏松药物去势法是一种非手术造模方法，通过给予抑制动物雌激su分泌的药物，如促黄体激su释放激su受体激动剂等，造成骨量丢失，模拟人类骨质疏松的病理过程。这种方法避免了手术创伤，但需注意药物不良反应和药物间的相互作用。

造模方法步骤如下：

（1）实验鼠的选择与准备

种属与品系：选择SPF级C57BL/6小鼠或SD大鼠。

性别：雌性。

年龄与体重：6-8周龄，体重18g-20g（小鼠）；或3-9月龄，体重200-220g（大鼠）。

（2）实验分组

根据实验需要，将实验鼠随机分为正常对照组、药物去势模型组、阳性对照组等。

（3）药物准备与给药

药物选择：选择能够降低实验鼠体内雌激su水平的药物，如促黄体激su释放激su受体激动剂、促性腺激su释放激su激动剂、雌激su受体拮抗剂等。

药物剂量：根据药物说明书和实验需求确定合适的药物剂量。例如，雌激su受体拮抗剂可按照一定剂量（如0.1mg/kg体重）进行给药。

给药方式：通过腹腔注射、口服等方式给药。对于口服给药，可将药物溶于适当的溶剂中，如超纯水，按照一定的浓度（如6.5%）和剂量（如150mg/kg体重）进行连续灌胃。

给药周期：持续给药一段时间，通常为数周至数月，以诱导骨质疏松的形成。

（4）监测与记录

生理指标监测：定期观察实验鼠的体重、活动能力、毛色等生理指标，并记录死亡情况。

骨密度监测：在给药结束后，使用X线或其他方法测量各组实验鼠的骨密度（BMD），以评估骨质疏松的程度。

（5）病理检测

在实验结束后，处死实验鼠，取股骨或胫骨等骨骼样本进行病理检测。

通过HE染色等方法观察骨骼样本的病理形态学变化，如骨小梁断裂、排列稀疏、形态结构完整性差等，以进一步验证骨质疏松模型是否成功建立。

优点：

非侵入性：药物去势法避免了手术操作对实验鼠的创伤，减少了实验过程中的动物痛苦和应激反应。

可复制性好：通过药物干预可以较为稳定地模拟出骨质疏松的病理状态，实验结果具有较好的可重复性。

易于操作：与手术去势法相比，药物去势法操作简便，无需特殊的手术设备和技能。

缺点：

药物不良反应：使用的药物如促黄体激su释放激su受体激动剂、促性腺激su释放激su激动剂等可能存在不良反应，如激su水平异常、代谢紊乱等，可能影响实验结果。

药物相互作用：药物去势法中使用的药物可能与抗骨质疏松药物产生相互作用，从而影响实验结果的准确性。

可信度影响：由于药物不良反应和药物相互作用的存在，药物去势法建立的骨质疏松模型在一定程度上可能降低实验的可信度。

2.手术去势法

手术去势法主要包括切除雌性大鼠的双侧卵巢，以模拟人类绝经后雌激su水平下降导致的骨质疏松。常用方法包括背侧或腹侧切口，切除卵巢后缝合切口。此方法建模成功率高，能很好地体现雌激su水平下降对骨代谢的影响，是骨质疏松研究的重要工具。

造模方法步骤如下：

（1）动物准备

种属、品系：选择SPF级SD大鼠或C57BL/6小鼠。

性别：雌性。

年龄与体重：对于大鼠，通常选择3-9月龄，体重在200-220g；对于小鼠，选择6-8周龄，体重为18g-20g。

（2）手术准备

麻醉：使用适当的麻醉剂（如戊巴比妥钠）对实验鼠进行麻醉。

消毒：对手术区域进行消毒处理，确保无菌环境。

（3）手术过程

切口：

在大鼠的脊柱两侧背部肋骨下缘开1-2cm切口。对于小鼠，则在腹股沟水平沿腹中线剪开皮肤及肌层。

分离与摘除：

大鼠：由皮肤-筋膜-肌肉用剪刀依次剪开或钝性分离，拨开脂肪团褶皱可见粉红色菜花状卵巢。将卵巢及输卵管挑出，靠近子gong处连带脂肪组织结扎，剪下卵巢及部分输卵管。

小鼠：分离子gong并摘除卵巢，清理伤口。

缝合：

清理伤口后，对手术切口进行缝合，可以是单层或双层缝合。

（4）术后处理

防感染：术后连续3天在造模组大鼠后腿肌肉内侧注射青霉素，每只4万IU/d。

观察与记录：定期观察实验鼠的状态及死亡情况，并做好记录。

（5）模型评价

在造模后的特定时间点（如第8天），处死实验鼠进行骨密度测定和骨组织HE染色观察微细结构。

通过比较实验组和对照组的骨密度、骨组织病理形态学变化等指标来评价模型是否成功建立。

注意事项

确保手术过程的无菌操作，防止感染。

控制好药物的剂量和使用时间，以减少副作用。

根据实验目的和要求选择合适的实验鼠品系和年龄。

优点：

建模成功率高：通过手术切除雌性大鼠的双侧卵巢，可以造成雌激su水平急剧下降，进而模拟出人类绝经后骨质疏松的病理状态。这种方法具有建模因素单一、建模成功率高的特点。

可重复性好：手术去势法是一种相对成熟的技术，操作稳定，可重复性好，实验结果较为可靠。

能够体现重要病理生理现象：该方法能够很好地体现雌激su水平下降这一重要病理生理现象，有助于深入研究骨质疏松的发病机制和治疗方法。

建模周期短：大鼠在手术后2个月即可出现骨量和骨密度的下降，3到4个月后这种变化更加明显，相对较短的时间内即可完成模型建立。

缺点：

手术创伤：手术去势法需要切除实验鼠的双侧卵巢，对实验鼠造成了一定的手术创伤，可能导致应激反应，对实验结果产生干扰。

操作复杂：手术去势法需要一定的手术技能和设备，操作相对复杂，对实验人员的要求较高。

实验成本较高：由于需要手术操作，手术去势法的实验成本相对较高，包括手术器械、麻醉药品等费用。

更多服务咨询请致电：

15001394959

15555144551

17666664644

导科医药竭诚为您服务~